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Comment l’étalonnage des microplaques est-il effectué ?

Les lecteurs de microplaques sont des équipements optiques utilisés pour la détection de phénomènes, physiques, chimiques ou biologiques, par la lecture de l’absorbance. Ils sont également connus sous le nom de lecteurs ou spectrophotomètres ELISA, car ils sont associés au test ELISA ou test d’immunoabsorption lié à l’enzyme, une technique de laboratoire utilisée pour la détection d’antigènes dans les échantillons. Les lecteurs de microplaques ont un fonctionnement similaire à celui des spectrophotomètres à ultraviolet, car ils mesurent la quantité de lumière absorbée par un échantillon à différentes longueurs d’onde. Ils sont composés de 3 éléments principaux, le détecteur, le monochromateur et la source d’éclairage.

Ces équipements sont particulièrement utilisés pour effectuer des analyses qualitatives ou des analyses quantitatives dans différentes industries, laboratoires biotechnologiques, cliniques, biochimiques, de recherche ou de développement, entre autres. C’est pourquoi il est extrêmement important qu’ils soient calibrés, un bon étalonnage détermine la performance de cet équipement et donc la qualité des résultats obtenus.

Lecteurs de microplaques ou lecteurs ELISA

Le lecteur de microplaques ou lecteur ELISA, est un type de spectrophotomètre, il se différencie des spectrophotomètres conventionnels parce qu’il dispose de grilles ou de filtres qui limitent la longueur d’onde à utiliser, c’est-à-dire qu’ils ne peuvent pas travailler sur de larges plages de longueurs d’onde, ils travaillent généralement dans des plages situées entre 400 nm et 750 nm (région visible), ils sont très peu ceux qui travaillent avec la lumière ultraviolette et effectuent des analyses entre 340 nm et 700 nm.

Le système optique des lecteurs de microplaques est conçu pour diriger la lumière vers les puits ou puits de la microplaque, où se trouve l’échantillon analysé. La lumière traverse l’échantillon, ce faisceau a un diamètre variant entre 1 mm et 3 mm. Le système de détection reçoit l’énergie lumineuse qui traverse l’échantillon, puis l’amplifie et mesure l’absorbance, enfin, à travers son système de lecture, il transforme ce mesuré en données qui peuvent être analysées par l’utilisateur. Les microplaques dans lesquelles l’échantillon est placé sont faites de polyestrène, elles disposent d’une quantité définie de micropuits qui, en général, est de 96, disposés dans une configuration de 8 rangées par 12 colonnes. Aujourd’hui, il existe de nombreux types de lecteurs de microplaques, allant de modèles très simples à des modèles plus sophistiqués qui possèdent des programmes de lecture spécifiques.

Étalonnage des lecteurs de microplaques

La raison pour laquelle tout lecteur de microplaques ou lecteur ELISA doit être calibré est que, à travers ce processus, on détermine le biais instrumental et l’incertitude des résultats obtenus par l’équipe. L’échelle qui est calibrée dans les lecteurs ELISA, est la photométrie, cela se fait à travers des filtres de densité neutre, enfin, la magnitude qui est calibrée est l’absorbance. Les filtres utilisés sont de forme circulaire et sont posés sur une plaque métallique ayant les mêmes dimensions que la microplaque apportée par le lecteur ELISA.

L’étalonnage des lecteurs de microplaques est une procédure qui doit être effectuée par un technicien de laboratoire ou par un personnel formé qui connaît l’équipement et qui peut suivre les instructions qui doivent être incluses dans l’équipement. Pour la réalisation de l’étalonnage, il est nécessaire de posséder un ensemble de filtres gris, qui sont montés sur une plaque métallique semblable à la microplaque d’analyse. Les filtres peuvent être utilisés pour effectuer des étalonnages dans les longueurs d’onde manipulées par l’équipement, c’est-à-dire qu’ils peuvent venir dans les longueurs d’onde suivantes : 405 nm ; 450 nm ; 490 nm ; 550 nm ; 620 nm ; 630 nm ; 690 nm ; et 750 nm.

Lecteurs de microplaques Kalstein

Chez kalstein, nous sommes les leaders FABRICANTS d’une large gamme d’instruments et d’équipements de recherche et de laboratoire. Nos modèles se caractérisent par la technologie la plus récente aux PRIX les plus accessibles trouvés sur le marché. Si vous cherchez un lecteur de microplaques, il est au bon endroit, notre lecteur ELISA modèle YR se caractérise par:

  • Interface d’opération Windows, bouton de figure, opération de souris, écran tactile.
  • Plaque de 96 puits, plusieurs essais sur une seule plaque.
  • Plaque d’agitation, vitesse et chaux réglable.
  • Vous pouvez ajouter ou modifier des systèmes ouverts, des éléments de test et des paramètres.

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Utilisation du Lecteur de Microplaque pour le dépistage du VIH

Dans les entreprises de santé, ils pratiquent des pratiques de laboratoire avec des équipements appropriés pour la détection du virus de l’immunodéficience humaine ou bien connu comme le VIH, par des techniques spéciales comme ELISA ou par son acronyme en anglais Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ou Essai par immunoabsorption liée aux enzymes.

Cette technique est réalisée pour la détection d’antigènes par des anticorps liés à une enzyme, par l’intermédiaire d’un produit détectable, manifestant un changement de couleur, ce qui induit la mesure avec l’utilisation du Lecteur de Microplaque.

Cet instrument est important pour savoir, entre autres choses, si un patient a une infection auto-immune, et Kalstein a l’équipement idéal, le Lecteur de microplaques (ELISA), montre qu’il est idéal pour les tests de laboratoire, où il vérifie et certifie l’adéquation des processus importants et montre des résultats fiables visant à diagnostiquer des maladies comme le VIH.

Fonctions du lecteur de microcarte (ELISA)

Pour effectuer des tests pour la détection des maladies auto-immunes, le lecteur de microplaque par la technique ELISA est l’équipement formé, à ces fins, parce qu’il est conçu pour mesurer les quantités de lumière que le test transmet pour diverses extensions d’onde et disposent d’une source d’éclairage en tungstène avec un niveau allant de 400 nm à 700nm.

Il dispose également de mécanismes qui séparent le spectre d’éclairage et fournissent de l’énergie vers une onde donnée qui doivent être étalonnés périodiquement pour ne pas répondre aux mesures à effectuer. Une Microplaque est de forme rectangulaire d’environ 12,5 cm sur 8,5 cm, également appelés plaques de répétition et ont 96 puits sur 8 rangées et 12 colonnes, où chacune symbolise une valeur d’absorbance à diverses extensions d’onde.

Pratiques d’immunoabsorption par les enzymes (ELISA)

Pour la détection d’infections par le VIH, l’enzymoimmunodosage d’adsorption est généralement la technique utilisée pour de telles pratiques, car elle a peu de chance de donner de faux résultats. La pratique se fonde sur la déduction qu’après ajustement d’antigènes faisables à une centrale solide insoluble, ceux-ci arrêtent l’activité immunologique et que ces biomolécules parviennent également à se lier à une enzyme, en arrêtant les résultats tant sur l’agilité enzymatique que sur l’agilité immunologique.

Cependant, son avantage est dû à son degré élevé de compréhension, de détectabilité, de ponctualité et de précision, ce qui permet aux pratiques selon la technique d’ELISA de s’équiper en essais radio sans erreur.

En outre, ce type de test s’est amélioré parce que, auparavant, seuls certains anticorps pouvaient être détectés et pas aussi rapidement qu’ils le devraient, alors qu’actuellement, la technique d’ELISA permet de tester certains anticorps et même certaines protéines du virus dans lesquelles ils contiennent des concentrations élevées dans le sang au cours de la première phase de l’infection.

Il est à noter que ces tests sont généralement les plus efficaces pour être analysés avec un nombre d’échantillons par jour, soit dans de grandes banques de sang ou dans des études de surveillance. Pour ce faire, il nécessite un utilisateur expert ou un technicien spécialisé dans l’entretien de l’équipement, en plus d’un approvisionnement électrique régulier, ceux-ci étant les plus appropriés pour être utilisés dans les hôpitaux ou les petits laboratoires.

Lecteur de microplaque (ELISA) marque Kalstein

Chez Kalstein, nous fabriquons des lecteurs de microplaques spécialisés dans l’application de la technique ELISA. Il dispose de la technologie la plus avancée pour que nos clients se sentent satisfaits et nous avons les meilleurs prix du marché. Ils appartiennent à la série YR et possèdent des caractéristiques attrayantes, telles que la longueur d’onde de 405nm, 450nm, 492nm, 630nm. Plage de lecture de 0 000 à 4 000 Abs. Niveau de correspondance ≤0.015a. Linéarité de R > 0.999. Il dispose également d’un écran tactile couleur LCD de 10,4 pouces. L’impression d’un rapport complet, comprenant des informations sur l’hôpital et le patient et les résultats des tests et un ordinateur portable intégré, facile à utiliser.

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Conseils pour le fonctionnement du lecteur ELISA

Un analyseur ELISA est un spectrophotomètre spécialisé, conçu pour lire les résultats de cette technique. Il est utilisé pour déterminer la présence d’anticorps ou d’antigènes spécifiques présents dans un échantillon. La technique repose sur la détection d’un antigène immobilisé sur une phase solide, au moyen d’anticorps produisant directement ou indirectement une réaction dont le produit peut être lu par le spectrophotomètre. Il est également connu sous le nom de lecteur ELISA.

Quel est le principe de votre opération?

Comme déjà mentionné, l’analyseur ELISA est un spectrophotomètre spécialisé. Contrairement aux spectrophotomètres conventionnels qui permettent des lectures dans une large gamme de longueurs d’onde, il possède des filtres de diffraction ou des grilles qui limitent la gamme de longueurs d’onde à celles utilisées dans la technique ELISA, qui est généralement réalisée avec des longueurs d ‘onde comprises entre 400 et 750 nm – mètres. Certains analyseurs fonctionnent dans le domaine ultraviolet et peuvent effectuer des analyses entre 340 et 700 nm.

Quel est le matériel nécessaire pour effectuer des tests ELISA?

Pour développer la technique ELISA, il est nécessaire de disposer au minimum des équipements suivants:

– Un analyseur ELISA.

– Une laveuse ELISA.

– Un système de distribution de liquide. (Des pipettes multicanaux peuvent être utilisées).

– Un incubateur spécialisé pour les plaques.

Comment se passe votre calibration?

L’étalonnage d’un analyseur ELISA est un processus spécialisé qui doit être effectué par un technicien ou un ingénieur dûment formé, en suivant les instructions fournies par chaque fabricant. Pour effectuer l’étalonnage, il est nécessaire de disposer d’un ensemble de filtres gris, montés sur une plaque de même géométrie que celle utilisée pour les analyses. Les fabricants fournissent de tels filtres et peuvent être utilisés pour effectuer des étalonnages à n’importe quelle longueur d’onde de celles utilisées par l’équipement.

De quel service a besoin cet équipement?

Pour que l’analyseur ELISA fonctionne correctement, il est nécessaire de vérifier les points suivants:

– Un environnement propre et sans poussière.

– Une table de travail stable. Il est conseillé de l’éloigner des équipements générant des vibrations (centrifugeuses, agitateurs) de taille suffisante pour permettre de localiser, à côté de l’analyseur ELISA, les équipements complémentaires nécessaires à la mise en oeuvre de la technique mentionnée: laveuses, incubateur, distributeur et ordinateur avec périphériques.

– Une source d’approvisionnement en électricité conforme aux normes en vigueur dans le pays. Dans les pays américains, on utilise généralement des tensions de 110 V et des fréquences de 60 Hz.

Quelle devrait être la routine de maintenance?

Maintenance de base (fréquence: quotidienne)

– Vérifiez que les capteurs optiques de chaque canal sont propres. Si de la saleté est détectée, nettoyez avec une brosse la surface des fenêtres des émetteurs de lumière et des capteurs.

– Confirmez que le système d’éclairage est propre.

– Vérifiez que l’étalonnage de l’analyseur est adéquat. Lorsque les opérations quotidiennes commencent, laissez l’analyseur se réchauffer pendant 30 minutes. Ensuite, effectuez une lecture à blanc puis lisez un module rempli de substrat. Les lectures doivent être identiques. Si ce n’est pas le cas, inversez le module et répétez la lecture afin de déterminer si l’écart provient du module ou du lecteur.

– Examiner l’avancement automatique de la plaque. Il doit être lisse et constant.

Maintenance préventive (fréquence: trimestrielle)

– Vérifiez la stabilité de la lampe. Utilisez le filtre d’étalonnage en effectuant des lectures à des intervalles de 30 minutes ou sur la même plaque. Comparez les lectures. Il ne devrait pas y avoir de différences.

– Nettoyez les systèmes optiques des détecteurs et des systèmes d’éclairage.

– Nettoyez le mécanisme d’avance de la plaque. Vérifiez l’alignement de chaque puits avec les systèmes émetteurs et les détecteurs de lumière.

Chez Kalstein, nous vous proposons un nouveau lecteur ELISA qui vous permettra d’offrir la meilleure analyse possible car il dispose de la meilleure technologie. C’est pourquoi nous vous invitons à jeter un coup d’œil sur ICI.