La mesure de l’intensité, du spectre, de la durée de vie et de la polarisation de la fluorescence permet de déterminer la présence de fluorophores et leurs concentrations. L’équipement utilisé est appelé fluoromètre, c’est un instrument d’analyse conçu pour la détermination de la concentration de composés fluorescents.

La technique d’analyse est appelée fluorométrie, elle est largement acceptée dans le domaine scientifique, c’est un outil d’analyse précieux et puissant, tant pour l’analyse quantitative que qualitative. C’est une technique d’émission optique sensible, qui consiste à exciter les molécules d’échantillons avec une source de photons. La fluorométrie est encore à l’étude, les instruments modernes offrent de nombreux avantages qui facilitent la collecte des données. Il est généralement utilisé s’il n’existe pas de méthode colorimétrique suffisamment sensible ou sélective pour la substance à déterminer.

Avantages de l’utilisation du fluoromètre

• La sensibilité : la plupart des analytes permettent un taux de détectabilité de parties par trillion, la limite de détection dépend en grande partie de l’échantillon mesuré. Cette fonctionnalité permet la détection en utilisant de petites quantités d’échantillons. La fluorométrie, en raison de sa sensibilité élevée, est utilisée pour quantifier l’ADN, l’ARN et le PCR, elle permet de détecter la contamination de l’ADN dans les médicaments et de réaliser des tests de vitamines pour les procédures pharmaceutiques.
• La spécificité : les fluoromètres sont très spécifiques car ce sont les composés cibles qui absorbent et émettent de la lumière, et sont donc moins susceptibles d’interférences avec d’autres agrégats présents dans l’échantillon. Cet instrument permet d’identifier la présence et la quantité de molécules spécifiques dans un milieu.
• Linéarité dans la plage de concentration : L’intensité de la fluorescence est généralement directement proportionnelle à la concentration de l’absorbeur. Les concentrations d’inconnus peuvent être quantifiées mathématiquement par rapport à l’intensité fluorescente des biomolécules connues dans l’essai. Les fluoromètres modernes peuvent détecter des concentrations de molécules fluorescentes aussi faibles que 1 ppt, la plage de longueur d’onde opérationnelle du fluoromètre dépend des exigences de l’expérience.
• Simplicité et vitesse de réponse : la sensibilité et la spécificité du fluoromètre permettent de réduire les protocoles expérimentaux pour la préparation des échantillons qui sont rigoureux pour d’autres méthodes d’analyse. C’est pourquoi la fluorométrie est une technique d’analyse relativement simple qui permet une analyse simple, pratique et rapide.
• Économique : les coûts associés aux réactifs et à l’instrumentation sont faibles par rapport aux autres techniques d’analyse. La fluorométrie est une technique puissante utilisée pour diverses applications environnementales, industrielles, diagnostiques, de séquençage de l’ADN, d’analyse médico-légale, génétiques et biotechnologiques. Le fluoromètre est un dispositif qui peut être trouvé dans différentes présentations qui permet de répondre à la demande propre de la recherche.

Fluoromètres à filtres

Le dispositif a une source d’excitation, des filtres, des cellules d’échantillon et des détecteurs de fluorescence. Les fluoromètres à filtre sont configurés en un seul faisceau, avec un contrôle de l’intensité de la source pour réduire les effets des fluctuations sur la réponse du détecteur. Ces sources peuvent produire un rayonnement intense de 254 nm, la source lumineuse la plus commune étant les lampes à arc au xénon. La sélection de la longueur d’onde d’excitation se fait en insérant un filtre primaire dans le faisceau incident avec cela on obtient un spectre avec une bonne pureté spectrale.

Le fluoromètre à filtre est un bon choix lorsque des mesures quantitatives sensibles sont souhaitées pour des composés spécifiques. Cet appareil fournit une mesure relative et peut être étalonné à l’aide d’un étalon de concentration connu ou corrélé à d’autres méthodes de laboratoire. Les instruments modernes à microprocesseurs offrent de nombreuses possibilités de manipulation de données via le logiciel. Ils comprennent des options de traitement et d’affichage des données, soustraction de signal vide, spectres dérivés, filtrage de spectres, détection de pics, statistiques de paramètres.

Chez Kalstein, nous sommes PRODUCTEURS, nous vous proposons des équipements de haute qualité, le fluoromètre de la série YR412-A, a une source de lumière LED de 260 nm, de plage dynamique linéaire de 0,995, avec détecteur de photodiode et sensibilité 0.5ng/ml. C’est un équipement léger qui offre praticité et polyvalence pour le travail en laboratoire. Pour plus d’informations sur nos produits, ACHAT ou VENTE, visitez notre site Web : ICI