L’COVID-19 est une maladie virale infectieuse causée par le virus connu sous le nom de SRAS-CoV-2. Elle se caractérise par de la fièvre, de la toux, un essoufflement, des douleurs musculaires et de la fatigue. Cependant, dans certains cas où la maladie devient grave, elle peut provoquer une pneumonie, une septicémie, un syndrome de détresse respiratoire ou un choc circulatoire. Les personnes peuvent être infectées lorsqu’un individu infecté émet des microgouttes de liquide en parlant, en éternuant, en respirant ou en toussant.
Il existe plusieurs tests pour diagnostiquer le COVID-19, l’un des plus courants et des plus utilisés étant le test RT-PCR, pour lequel l’échantillon est prélevé par écouvillonnage nasopharyngé ou dans une partie des voies respiratoires, comme le pharynx. Malgré l’existence de ce test, il en existe d’autres qui sont tout aussi utiles pour le diagnostic et le suivi de la maladie. Il s’agit des tests sérologiques qui, à la différence de la PCR, utilisent le sérum qui est séparé du sang du patient à diagnostiquer. Le diagnostic à l’aide de tests sérologiques est très important pour l’identification et le suivi des personnes infectées, immunisées et potentiellement protégées. Deux des tests les plus courants sont le test immunochromatographique et le test ELISA.
Principes de base d’un lecteur de microplaques
Les lecteurs de microplaques sont des instruments utilisés dans les laboratoires pour détecter les agents physiques, chimiques ou biologiques contenus dans un échantillon en cours d’évaluation. Ce sont des équipes multimodales, ce qui signifie qu’elles ont la capacité d’effectuer plusieurs types de tests ou d’expériences en même temps. Ses principales fonctions sont les mesures de fluorescence, de luminescence et d’absorbance.
Tous les lecteurs de microplaques sont constitués de micropuits ou de puits, dans lesquels est déposé l’échantillon à analyser. L’un des tests les plus courants réalisés par cette équipe est le test ELISA, qui permet de diagnostiquer les antigènes dans le sang. Des maladies telles que la dengue, l’hépatite B, la fièvre jaune, le VIH et le COVID-19 peuvent être diagnostiquées grâce à ce test.
Protocole de détection du COVID-19 par test ELISA et lecteur de microplaques
ELISA est un type de test immunitaire, dont le nom est un acronyme pour Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ce qui signifie test d’immunosorbent lié à l’enzyme. La technique ELISA est couramment utilisée pour la détection d’antigènes ou d’anticorps, ainsi que de protéines et de glycoprotéines présentes dans les échantillons biologiques. En médecine et en biochimie clinique, le test ELISA est particulièrement utile en raison de sa sensibilité et de sa spécificité élevées, de la simplicité du protocole et de la sécurité, puisque aucun réactif dangereux n’est nécessaire. Les étapes de la technique ELISA COVID-19 sont décrites ci-dessous :
- Le sérum du patient est déposé dans les micropuits de la plaque du lecteur de microplaques, où se trouve l’antigène SARS-CoV-2.
- Si des anticorps du SARS-CoV-2 sont présents dans l’échantillon du patient, ils reconnaîtront l’antigène et formeront un complexe. La boîte est ensuite lavée avec une solution détergente pour éliminer les éléments ou cellules non spécifiques.
- L’anticorps de capture marqué par l’enzyme est ajouté.
- Le substrat de l’enzyme est ajouté pour une incubation ultérieure.
- Dans les micropuits où l’échantillon provient de patients infectés et possédant des anticorps contre le virus, les anticorps marqués par l’enzyme agiront sur le substrat et un changement de couleur se produira, ce qui signifie que le test est positif.
- Le changement de couleur peut être évalué à l’œil nu ou quantifié à l’aide d’un lecteur de microplaques.
- Si le test est négatif, le substrat ne change pas de couleur.
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