Un fluoromètre est un équipement qui permet l’analyse, l’identification et la quantification de substances chimiques avec des molécules capables de présenter une fluorescence, en utilisant la technique de spectrophotométrie de fluorescence ou fluorométrie. On peut dire que cet équipement est un appareil optique spécial utilisé dans les laboratoires, capable de mesurer la qualité fluorescente d’échantillons biologiques ou minéraux. Parmi les applications où un fluorimètre est utilisé, on peut citer les suivantes :
- Dynamique des protéines.
- Analyse quantitative.
- Études des membranes cellulaires.
- La cinétique des enzymes.
- Nanostructures de carbone.
- Caractérisation de sondes fluorescentes.
- Mesures de phosphorescence à court terme.
- Mesures de stabilité thermique.
Structure d’un fluorimètre
Un fluorimètre a plusieurs composants clés. Il a une source d’entrée pour la lumière visible ordinaire, et cette lumière passe à travers un filtre d’excitation qui permet uniquement à des longueurs d’onde spécifiques d’avoir un impact sur la cellule d’échantillon du matériau à l’étude. Lorsque ce matériau, qu’il soit organique ou inorganique, est bombardé par ces longueurs d’onde de lumière contrôlées, ils émettent une fluorescence, émettant sa propre lumière caractéristique qui passe ensuite à travers un filtre d’émission. Les émissions sont lues par un détecteur de lumière qui produit une lecture permettant à l’observateur de savoir comment l’échantillon réagit et quel est son contenu.
Le mécanisme de fluorescence est marqué par trois étapes séquentielles, respectivement appelées absorption (1), dissipation non radiative (2) et émission (3). Le phénomène de fluorescence a de nombreuses applications pratiques, y compris par exemple l’analyse en minéralogie, gemmologie, capteurs chimiques (spectroscopie fluorescente), pigments et encres, détecteurs biologiques et lampes fluorescentes.
Qu’est-ce qu’un spectrophotomètre ?
Un spectrophotomètre est un appareil qui mesure la quantité de lumière absorbée par une substance. Son efficacité, sa résolution, sa sensibilité et sa gamme spectrale dépendront des variables de conception et de la sélection des composants optiques qui le composent. La spectrophotométrie est la mesure quantitative des propriétés de transmission d’un matériau à partir de l’onde lumineuse.
Il est utilisé pour mesurer certains composés, comme un médicament, pour s’assurer qu’il est efficace et sans danger pour les consommateurs. Vous pouvez mesurer la croissance bactérienne ou diagnostiquer un patient en fonction de son urine. Il est également utilisé dans l’analyse de l’ADN, de l’ARN et des protéines.
Ces kits nous donnent des informations sur la nature de la substance dans l’échantillon, car chaque substance a un arrangement tridimensionnel particulier d’atomes qui fait que chaque substance a des caractéristiques uniques. Il nous indique également quelle quantité de la substance qui nous intéresse est présente dans l’échantillon. La concentration est proportionnelle à l’absorbance, selon la loi de Beer-Lambert : plus il y a de molécules présentes dans l’échantillon, plus la quantité d’énergie absorbée par leurs électrons est importante. Le spectrophotomètre mesure l’absorbance d’un échantillon dans les spectres de lumière ultraviolette et visible (200 à 850 nm).
Structure d’un spectrophotomètre
- Source lumineuse : Elle éclaire l’échantillon. Il doit répondre aux conditions de stabilité, de directivité, de distribution spectrale continue de l’énergie et de longue durée de vie. Les sources utilisées sont la lampe au tungstène et la lampe à arc au xénon.
- Monochromateur : C’est un dispositif qui permet d’obtenir une lumière monochromatique, et se compose des fentes d’entrée et de sortie, des collimateurs et de l’élément de dispersion. Il isole le rayonnement de la longueur d’onde souhaitée qui est incident ou réfléchi par l’ensemble.
- Photodétecteurs : Dans les instruments modernes, il existe une série de 16 photodétecteurs pour percevoir simultanément le signal dans 16 longueurs d’onde, couvrant le spectre visible.
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