Le microscope à champ sombre est un type de microscope optique utilisé dans certains types de laboratoires. Il a les mêmes caractéristiques que n’importe quel microscope composite, à la différence qu’une modification est apportée au condensateur avant que la lumière n’atteigne l’échantillon. Ce type de microscopes permet d’augmenter le niveau de contraste, de sorte qu’il est possible d’observer certaines caractéristiques qu’avec la microscopie en champ clair serait impossible.
La microscopie de champ sombre est idéale lorsque vous souhaitez révéler des bords ou des contours, elle est parfaite pour observer des micro-organismes tels que des diatomées, des bactéries sans coloration, des os, des fibres, des cheveux, des protozoaires et des tissus, entre autres. Des échantillons non biologiques, tels que des cristaux, des particules colloïdales, des poudres, de la céramique et de fines sections de polymères, peuvent également être observés.
Fonctionnement d’un microscope à champ sombre
Dans la microscopie de champ sombre, il existe deux types d’éclairage sur lesquels repose son fonctionnement, la translumination et l’épiéclairage, l’utilisation de ces derniers dépend de ce que l’on veut mettre en évidence, par exemple, si l’on veut observer des particules fines ou s’il faut apprécier le bord de ce qui est observé dans l’échantillon. Les deux types sont expliqués ci-dessous :
- Translumination : il est basé sur le blocage des rayons de lumière avant qu’ils n’atteignent le condensateur, pour ce faire, on utilise un dispositif qui empêche le passage. Avec ce type d’éclairage, vous pouvez observer des structures ou des particules très fines. Vous obtiendrez des images relativement lumineuses qui apparaissent sur un arrière-plan noir.
- Epi-éclairage : dans ce cas, un filtre en forme de croissant est nécessaire au microscope pour rendre la lumière oblique. Avec l’éclairage oblique les structures observées auront un effet de relief, ce qui permet de mettre en évidence les bords de particules. Ce type d’éclairage est particulièrement utile pour les échantillons en suspension.
Utilisations des microscopes de champ sombre
Ils sont particulièrement utiles lorsque vous devez évaluer des échantillons sans les endommager ou appliquer une coloration. Certaines bactéries, par exemple, ont besoin de certaines teintures, pour pouvoir être observées sous le microscope de champ clair, une variante est l’utilisation des microscopes de champ sombre, qui permettent de détailler certaines caractéristiques, ce qui les rend des équipements très utiles pour analyser certains types d’échantillons cliniques.
Ils permettent également de visualiser des échantillons vivants en suspension, par exemple certains micro-organismes, ce qui permet d’apprécier la paroi cellulaire ou la capsule. En bioanalyse, ils sont particulièrement utiles, car le comportement des cellules sanguines peut être observé, sans qu’il soit nécessaire d’ajouter un réactif supplémentaire.
Avantages et inconvénients du microscope à champ sombre
Le microscope à champ sombre présente certains inconvénients par rapport au microscope à champ clair, en particulier dans la visualisation de l’échantillon. Avec le microscope de champ sombre, il est nécessaire de préparer correctement l’échantillon pour qu’il ne soit pas très épais, car de cette façon on ne pourrait rien apprécier, d’autre part, la résolution est plus basse et on ne peut pas observer des structures internes.
Cependant, cela ne fait pas un mauvais choix, car tout dépend du type d’échantillon à analyser, par exemple, si vous devez observer des micro-organismes vivants sans les endommager ou si vous voulez juste voir le contour de certains organismes pour les identifier, cet équipement devient un outil très utile.
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