Un lecteur ELISA est un spectrophotomètre spécialisé, conçu pour lire les résultats de cette technique qui est utilisée pour déterminer la présence d’anticorps ou d’antigènes spécifiques présents dans un échantillon. Cette technique est basée sur la détection d’un antigène immobilisé sur une phase solide, par des anticorps qui, directement ou indirectement, produisent une réaction dont le produit peut être lu par le spectrophotomètre.
Quels sont les équipements nécessaires pour effectuer les tests ELISA?
Pour développer la technique ELISA, il faut au moins disposer des équipements suivants:
• Un lecteur ELISA.
• Une laveuse ELISA.
• Un système de distribution de liquide. (Des pipettes multicanaux peuvent être utilisées).
• Un incubateur spécialisé pour les assiettes.
Quel est le principe de fonctionnement d’un lecteur ELISA?
Comme déjà mentionné, l’analyseur ELISA est un spectrophotomètre spécialisé. Contrairement aux spectrophotomètres conventionnels qui permettent des lectures dans une large gamme de longueurs d’onde, celui-ci a des filtres ou des réseaux de diffraction qui limitent la gamme de longueurs d’onde à celles utilisées dans la technique ELISA, qui est généralement effectuée avec des longueurs d’onde comprises entre 400 et 750 nm –anomètres–. Certains analyseurs fonctionnent dans la gamme ultraviolette et peuvent effectuer des analyses entre 340 et 700 nm.
Comment calibrer cet équipement?
L’étalonnage d’un analyseur ELISA est un processus spécialisé qui doit être effectué par un technicien ou un ingénieur correctement formé, en suivant les instructions que chaque fabricant fournit à cet effet. Pour effectuer l’étalonnage, il est nécessaire de disposer d’un ensemble de filtres gris, qui sont montés sur une plaque de la même géométrie que ceux utilisés pour effectuer les analyses. Les fabricants fournissent ces filtres et peuvent être utilisés pour effectuer des étalonnages à n’importe quelle longueur d’onde utilisée par l’équipement.
Que devez-vous garder à l’esprit lorsque vous utilisez un lecteur ELISA?
Pour que cet équipement fonctionne et fonctionne correctement, vous devez tenir compte des éléments suivants:
• L’équipement doit être utilisé dans un environnement propre et sans poussière.
• La table de travail où l’équipement est placé doit être stable. Il est recommandé de l’éloigner des équipements générateurs de vibrations – centrifugeuses, agitateurs -, de taille adéquate permettant de localiser, à côté de l’analyseur ELISA, les équipements complémentaires nécessaires à la réalisation de la technique en question: laveuses, incubateur, distributeur et ordinateur avec périphériques.
• L’alimentation doit être construite conformément aux normes et standards établis par le fabricant. Dans les pays américains, des tensions de 110 V et des fréquences de 60 Hz sont généralement utilisées.
Quelle routine devez-vous suivre pour l’entretien de base de ce lecteur?
• Vérifiez que les capteurs optiques de chaque canal sont propres. Si de la saleté est détectée, nettoyez la surface des fenêtres des émetteurs de lumière et des capteurs avec une brosse.
• Confirmez que le système d’éclairage est propre.
• Vérifiez que l’étalonnage de l’analyseur est adéquat. Lorsque les opérations quotidiennes commencent, laissez l’analyseur se réchauffer pendant 30 minutes. Ensuite, effectuez une lecture vierge, puis lisez un module plein de substrat. Les lectures doivent être identiques. Si ce n’est pas le cas, inversez le module et répétez la lecture, afin de déterminer si l’écart provient du module ou du lecteur.
• Examinez l’alimentation automatique de la plaque. Il doit être lisse et constant.
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